建立獲得較高比例的活性成年大鼠心肌細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法。方法:Langendorff灌流,膠原酶消化分離鈣耐受成年大鼠心肌細(xì)胞,加血清培養(yǎng)。光鏡觀察,結(jié)合形態(tài)學(xué)和臺(tái)盼藍(lán)染色評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞。
結(jié)果:分離的活性心肌細(xì)胞比率約70%-80%,桿狀、橫紋清晰。加血清貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸發(fā)生形態(tài)學(xué)改變。
結(jié)論:通過(guò)本方法可以對(duì)成年大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行良好的分離培養(yǎng)。
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心肌細(xì)胞
根據(jù)它們的組織學(xué)特點(diǎn)、電生理特性以及功能上的區(qū)別,粗略地分為兩大類(lèi)型:兩類(lèi)心肌細(xì)胞分別實(shí)現(xiàn)一定的職能,互相配合,完成心臟的整體活動(dòng)。一類(lèi)是普通的心肌細(xì)胞,包括心房肌和心室肌,含有豐富的肌原纖維,執(zhí)行收縮功能,故又稱(chēng)為工作細(xì)胞。工作細(xì)胞不能自動(dòng)地產(chǎn)生節(jié)律性興奮,即不具有自動(dòng)節(jié)律性;但它具有興奮性,可以在外來(lái)刺激作用下產(chǎn)生興奮;也具有傳導(dǎo)興奮的能力,但是,與相應(yīng)的特殊傳導(dǎo)組織作比較,傳導(dǎo)性較低。另一類(lèi)是一些特殊分化了的心肌細(xì)胞,組成心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng);其中主要包括P細(xì)胞和哺肯野細(xì)胞,它們除了具有興奮性和傳導(dǎo)性之外,還具有自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律性興奮的能力,故稱(chēng)為自律細(xì)胞,它們含肌原纖維甚小或完全缺乏,故收縮功能已基本喪失。還有一種細(xì)胞位于特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)的結(jié)區(qū),既不具有收縮功能,也沒(méi)有自律性,只保留了很低的傳導(dǎo)性,是傳導(dǎo)系統(tǒng)中的非自律細(xì)胞,特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)是心臟內(nèi)發(fā)生興奮和傳播興奮的組織,起著控制心臟節(jié)律性活動(dòng)的作用。
大鼠
大鼠1.大鼠性哺乳綱,嚙齒目,鼠科,大鼠屬動(dòng)物。2.繁殖快。大鼠2月齡時(shí)性成熟,性周期4天左右,妊娠期20(19~22)天,哺乳期21天,每胎產(chǎn)仔平均8只,為全年、多發(fā)情性動(dòng)物。3.喜啃咬、夜間活動(dòng)、肉食,白天喜歡擠在一起休息,晚上活動(dòng)大,吃食多,因此白天除實(shí)驗(yàn)必須抓取外,一般不要抓弄它。食性廣泛,喜吃各種煮熟的動(dòng)物肉。對(duì)光照較敏感。4.無(wú)膽囊:大鼠、鴿、鹿、馬、驢、象等動(dòng)物沒(méi)有膽囊,它們的總膽肝管括約肌的阻力很少,肝分泌的膽汁通過(guò)總膽管進(jìn)入十二指腸,受十二指腸端括約肌的控制。5.不能?chē)I吐:因此藥理實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)予注意。6.垂體一腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達(dá),應(yīng)激反應(yīng)靈敏。行為表現(xiàn)多樣,情緒敏感。7.視覺(jué)、嗅覺(jué)較靈敏,做條件反射等實(shí)驗(yàn)反應(yīng)良好,但對(duì)許多藥物易產(chǎn)生耐藥性。8.大鼠血壓和血管阻力對(duì)藥物反應(yīng)敏感,但對(duì)強(qiáng)心甙的作用較貓敏感性低671倍。9.肝臟再生能力強(qiáng),切除60~70%的肝葉仍有再生能力。10.對(duì)營(yíng)養(yǎng)、維生素、氨基酸缺乏敏感,可發(fā)生典型的缺乏癥狀。體內(nèi)可以合成維生素C。11.對(duì)炎癥反應(yīng)靈敏。它的眼角膜無(wú)血管。12.生長(zhǎng)發(fā)育期長(zhǎng),長(zhǎng)骨長(zhǎng)期有骨骺線(xiàn)存在,不骨化。13.成年雌鼠在動(dòng)情周期不同階段,陰道粘膜可發(fā)生典型變化,采用陰道涂片法(YaginalSmearTest)來(lái)觀察性周期中陰道上皮細(xì)胞的變化,可推知性周期各個(gè)時(shí)期中卵巢、子宮狀態(tài)與垂體激素的變動(dòng)。大鼠
結(jié)果:分離的活性心肌細(xì)胞比率約70%-80%,桿狀、橫紋清晰。加血清貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸發(fā)生形態(tài)學(xué)改變。
結(jié)論:通過(guò)本方法可以對(duì)成年大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行良好的分離培養(yǎng)。
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心肌細(xì)胞
根據(jù)它們的組織學(xué)特點(diǎn)、電生理特性以及功能上的區(qū)別,粗略地分為兩大類(lèi)型:兩類(lèi)心肌細(xì)胞分別實(shí)現(xiàn)一定的職能,互相配合,完成心臟的整體活動(dòng)。一類(lèi)是普通的心肌細(xì)胞,包括心房肌和心室肌,含有豐富的肌原纖維,執(zhí)行收縮功能,故又稱(chēng)為工作細(xì)胞。工作細(xì)胞不能自動(dòng)地產(chǎn)生節(jié)律性興奮,即不具有自動(dòng)節(jié)律性;但它具有興奮性,可以在外來(lái)刺激作用下產(chǎn)生興奮;也具有傳導(dǎo)興奮的能力,但是,與相應(yīng)的特殊傳導(dǎo)組織作比較,傳導(dǎo)性較低。另一類(lèi)是一些特殊分化了的心肌細(xì)胞,組成心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng);其中主要包括P細(xì)胞和哺肯野細(xì)胞,它們除了具有興奮性和傳導(dǎo)性之外,還具有自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律性興奮的能力,故稱(chēng)為自律細(xì)胞,它們含肌原纖維甚小或完全缺乏,故收縮功能已基本喪失。還有一種細(xì)胞位于特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)的結(jié)區(qū),既不具有收縮功能,也沒(méi)有自律性,只保留了很低的傳導(dǎo)性,是傳導(dǎo)系統(tǒng)中的非自律細(xì)胞,特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)是心臟內(nèi)發(fā)生興奮和傳播興奮的組織,起著控制心臟節(jié)律性活動(dòng)的作用。
大鼠
大鼠1.大鼠性哺乳綱,嚙齒目,鼠科,大鼠屬動(dòng)物。2.繁殖快。大鼠2月齡時(shí)性成熟,性周期4天左右,妊娠期20(19~22)天,哺乳期21天,每胎產(chǎn)仔平均8只,為全年、多發(fā)情性動(dòng)物。3.喜啃咬、夜間活動(dòng)、肉食,白天喜歡擠在一起休息,晚上活動(dòng)大,吃食多,因此白天除實(shí)驗(yàn)必須抓取外,一般不要抓弄它。食性廣泛,喜吃各種煮熟的動(dòng)物肉。對(duì)光照較敏感。4.無(wú)膽囊:大鼠、鴿、鹿、馬、驢、象等動(dòng)物沒(méi)有膽囊,它們的總膽肝管括約肌的阻力很少,肝分泌的膽汁通過(guò)總膽管進(jìn)入十二指腸,受十二指腸端括約肌的控制。5.不能?chē)I吐:因此藥理實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)予注意。6.垂體一腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達(dá),應(yīng)激反應(yīng)靈敏。行為表現(xiàn)多樣,情緒敏感。7.視覺(jué)、嗅覺(jué)較靈敏,做條件反射等實(shí)驗(yàn)反應(yīng)良好,但對(duì)許多藥物易產(chǎn)生耐藥性。8.大鼠血壓和血管阻力對(duì)藥物反應(yīng)敏感,但對(duì)強(qiáng)心甙的作用較貓敏感性低671倍。9.肝臟再生能力強(qiáng),切除60~70%的肝葉仍有再生能力。10.對(duì)營(yíng)養(yǎng)、維生素、氨基酸缺乏敏感,可發(fā)生典型的缺乏癥狀。體內(nèi)可以合成維生素C。11.對(duì)炎癥反應(yīng)靈敏。它的眼角膜無(wú)血管。12.生長(zhǎng)發(fā)育期長(zhǎng),長(zhǎng)骨長(zhǎng)期有骨骺線(xiàn)存在,不骨化。13.成年雌鼠在動(dòng)情周期不同階段,陰道粘膜可發(fā)生典型變化,采用陰道涂片法(YaginalSmearTest)來(lái)觀察性周期中陰道上皮細(xì)胞的變化,可推知性周期各個(gè)時(shí)期中卵巢、子宮狀態(tài)與垂體激素的變動(dòng)。大鼠