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PCR實驗室各區(qū)域儀器設備配備通常如下:
(1)試劑準備區(qū)儀器設備主要應有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈等??墒褂贸瑑艄ぷ髋_作為試劑配制操作臺面。
(2)標本制備區(qū)儀器設備主要應有生物安全柜(最好為B2,可避免提取核酸在柜內(nèi)反復循環(huán),造成標本間交叉“污染”,出現(xiàn)假陽性結果。此外還應配備加樣器、臺式高速離心機(冷凍及常溫)、臺式低速離心機、恒溫設備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。
(3)擴增區(qū)主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀(PCR儀,實時熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應專用,并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外,根據(jù)工作需要,還可配備加樣器、超凈臺等。
(4)產(chǎn)物分析區(qū):本區(qū)所使用的儀器設備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。
PCR基因擴增實驗室須擁有的條件:
1、 必須在無菌無塵環(huán)境下進行操作;
2、 檢測人員必須通過國家臨檢中心業(yè)務培訓并取得合格證書;
3、 必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證;
4、 檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求;
5、 必須擁有標準的PCR熒光實驗室。
PCR實驗室的布局:
PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并有專用走廊,各工作區(qū)域應設緩沖間,工作區(qū)域緩沖間宜安裝連鎖裝置;不同功能的工作區(qū)應是分隔獨立的,各工作區(qū)有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗,前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開;試驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),從試劑準備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動;實驗室的氣流也應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動,各工作區(qū)頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20平方一支40W的紫外燈。
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